PEI转染试剂

号:EP1001

规格1 mL

产品简介:

PEI MAX是一种功能强大,值得信赖且经济实惠的瞬时转染试剂,在HEK293CHO大多数表达系统中,PEI都能提供稳定的高转染效率。与传统PEI 25K相比性能更加稳定,而且可以在两个小时内完成整个转染过程,相对于大多数转染试剂而言,PEI MAX既能实现高效转染,又能使转染成本降低最少40%

适用范围:

适用于哺乳动物细胞的贴壁和悬浮转染。

保存条件:

4保存,一年有效。

使用说明:

1.接种细胞:转染前一天(24h左右),用胶原酶胰酶消化细胞并计数,细胞铺板,使其在转染时汇合度为70~90%;

2.准备DNA-PEI复合物:用一定体积的 Opti-MEM 或其他无蛋白培养基稀释质粒,小心混匀,记为A 液;用相等体积的 Opti-MEM 稀释PEI,小心混匀,记为B液,室温静止 5min。每1 μgDNA需用 0.5~2 μLPEI MAX。将 B 液缓慢滴加到 A 液中并混匀,边加边轻摇震荡混匀;

3.室温孵育 10~25 min;

4.转染细胞:将 DNA-PEI混合液缓慢加入到细胞培养基中,轻轻混匀。转染4h 后更换为新鲜培养基或提高培养液中血清浓度至15%;

5.37℃孵育细胞2 ~ 4天。然后分析转染细胞。

注意事项:

1. 转染前将试剂DNA培养基置于37预热备用;

2. 转染时较高的细胞密度可以得到更高的转染效率和表达水平,并能减少细胞毒性;

3. 对于HEK-293NIH/3T3COS细胞,转染前两天铺板可显著提高转基因表达水平,需要较低密度铺板使得转染前细胞汇合度仍为70%~80%;

4. 转染时一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的 PEI MAX 滴加至试管中(注意此步请勿颠倒添加顺序);

5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

质粒DNA转染的优化:

为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响,可以对DNAPEI MAX的比例以及细胞密度进行优化,一般在1:0.5~1:2的范围内优化DNAμgPEI MAX的比例。

1:不同细胞培养板中转染时培养基、核酸及PEI MAX用量:

细胞培养板

培养基用量

DNA转染

铺板培养基用量

稀释培养基用量

质粒用量

试剂用量

96-well

100 μL

2×25 μL

0.2 μg

0.3 μL

24-well

500 μL

2×50 μL

0.8 μg

1.2 μL

12-well

1 mL

2×100 μL

1.6 μg

2.4 μL

6-well

2 mL

2×250 μL

4 μg

6 μL

60-mm

5 mL

2×0.5 μL

8 μg

12 μL

10-cm

15 mL

2×1.5 mL

24 μg

36 μL


[营业执照]   版权所有Copyright © 2019-2021 河南普诺易生物制品研究院有限公司

客户服务热线

0373-2058988

17737369691

19836237919

在线客服