货号：CR1001

规格：50 mL

产品简介：

台盼蓝（Trypan Blue），一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料，可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜，将其染成蓝色，而活细胞由于其细胞膜的完整性，可将台盼蓝排斥在外，因此，通过颜色的变化即可将活细胞（活细胞呈透明无色）和死细胞鉴别开来，基于此原理，本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外，台盼蓝（合适浓度）还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。

本品为溶于PBS溶液的0.4%（w/v）台盼蓝染色液，以无菌形式提供，细胞培养级别。

保存条件：

2~8℃保存，一年有效。

使用说明：

1. 对于悬浮细胞，离心收集细胞，充分清洗后，用适当缓冲液如PBS，HBSS重悬制成单细胞悬液；对于贴壁细胞，先用胰酶消化细胞，再按照悬浮细胞的方法制备单细胞悬液。

2. 细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1比例混匀（终浓度 0.04%），染色3分钟（染色3分钟时间已经足够，但染色时间可以更长一些，但不宜超过10分钟）。

3. 取少量上述染色细胞加入血细胞计数板，于显微镜低倍镜下计数，分别计算着色细胞（即损伤细胞和死细胞）和总细胞。

【注1】：用移液枪加染色细胞时，沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不可过量加液或者不足量。

【注2】：1mm²方格内细胞数通常控制在20-50cells，当细胞数超过200个，需重新调整稀释倍数。

4. 按照以下公式来计算细胞数目和活细胞百分比。

a. 计算每mL细胞数目：Cells/ml=1mm²大方格内的平均细胞数×稀释倍数×10⁴。

【注】：此时的稀释倍数为：步骤2所取的单细胞悬液与台盼蓝染色液混合后的稀释倍数。

b. 总细胞数目：Total cells=（Cells/ml）×最初制备单细胞悬液的总体积。

c. 细胞活力值：Viability（%）=（总细胞数-总着色细胞数）/总细胞数×100。

注意事项：

本产品对人体有毒，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。