货号:CA1007
规格:1 mL
产品简介:
Blasticidin S是一种来自Streptomyces griseochromogenes的核酸选择性抗生素,作用原理是通过干扰核糖体中肽键的形成。Blasticidin S用于筛选携带有bsr或BSD耐受基因的转染细胞。杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用效果,较低的低浓度便能导致细胞迅速死亡。
目前已经克隆和测序的杀稻瘟菌素耐受基因有3种:
一、分离自产生菌Streptoverticillum sp.的乙酰基转移酶基因bls;
二、脱氨酶基因,包括从Bacillus cereus 中分离的bsr;
三、从Aspergillus terreus 中分离的BSD 基因。
Bsr和 BSD基因是哺乳动物和植物细胞的基因转移实验中,最常用的筛选标志,也可用于E.Coli。
工作浓度:
1)E. coli对Blasticidin S的敏感性低,但是转化子对Blasticidin S具有耐受性,可以用低盐LB培养基(pH 8)进行筛选,浓度范围为50-100 μg/ml Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。
2)哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1~50 μg/mL。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。
25~100 µg/mL in bacteria
1~30 µg/mL in mammalian cells
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
使用说明:
该产品的工作浓度与培养基中添加的血清量相关。因血清能够中和部分抗生素,所以,实际发挥作用的抗生素浓度低于设定的工作浓度。而在无血清培养基中,为了降低造成细胞毒性,使用时应适当减少用量。本产品经过0.1 μm滤膜过滤除菌,可以直接添加到细胞培养液内。
操作步骤(哺乳动物稳转株筛选):
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