杀稻瘟菌素 S(Blasticidin S),10 mg/mL

货号:CA1007

规格:1 mL

产品简介:

Blasticidin S是一种来自Streptomyces griseochromogenes的核酸选择性抗生素,作用原理是通过干扰核糖体中肽键的形成。Blasticidin S用于筛选携带有bsrBSD耐受基因的转染细胞。杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用效果,较低的低浓度便能导致细胞迅速死亡。

目前已经克隆和测序的杀稻瘟菌素耐受基因有3种:

一、分离自产生菌Streptoverticillum sp.的乙酰基转移酶基因bls

二、脱氨酶基因,包括从Bacillus cereus 中分离的bsr

三、从Aspergillus terreus 中分离的BSD 基因。

BsrBSD基因是哺乳动物和植物细胞的基因转移实验中,最常用的筛选标志,也可用于E.Coli

工作浓度:

1E. coliBlasticidin S的敏感性低,但是转化子对Blasticidin S具有耐受性,可以用低盐LB培养基(pH 8)进行筛选,浓度范围为50-100 μg/ml Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。

2)哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1~50 μg/mL。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。

25~100 µg/mL in bacteria

1~30 µg/mL in mammalian cells

保存条件:

-20℃保存,一年有效。

使用说明:

该产品的工作浓度与培养基中添加的血清量相关。因血清能够中和部分抗生素,所以,实际发挥作用的抗生素浓度低于设定的工作浓度。而在无血清培养基中,为了降低造成细胞毒性,使用时应适当减少用量。产品经过0.1 μm滤膜滤除菌,可以直接添加到细胞培养液内

操作步骤(哺乳动物稳转株筛选):


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